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ELISA黃曲霉毒素B1試劑盒(嬰幼兒米粉輔食)

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青島普瑞邦生物工程有限公司

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產(chǎn)品介紹

黃曲霉毒素B1 Aflatoxins B1ELISA檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱:黃曲霉毒素B1試劑盒

產(chǎn)品概述:黃曲霉毒素是曲霉菌屬的黃曲霉和寄生曲霉的二次代謝產(chǎn)物。這些霉菌來源于潮濕的熱帶地區(qū),大面積種植的糧食作物會被其污染。黃曲霉毒素是自然界*危險的致癌物質(zhì)。

黃曲霉毒素中毒性*強的是黃曲霉毒素B1,其幾乎一直和黃曲霉毒素B2、G1 和 G2共存。他們主要存在于玉米、花生、巴西堅果、棉籽和開心果中。美國食品和藥品監(jiān)督管理局(FDA)已對食品和飼料中的黃曲霉毒素**允許水平作了規(guī)定,因此,準確測定黃曲霉毒素含量對于食品和飼料的品質(zhì)監(jiān)控具有重要意義。

適用范圍

黃曲霉B1試劑盒可定性、定量檢測玉米、大米、麥類、豆類、花生、飼料、食用油等樣本中的黃曲霉毒素B1。

檢測限:0.1ppb

試驗原理

采用競爭ELISA,在微孔板上預(yù)包被黃曲霉毒素B1抗原,加入樣本(或黃曲霉毒素B1標準品溶液)及辣根過氧化物酶標記的黃曲霉毒素B1抗體。樣本或標準品溶液中的黃曲霉毒素B1與預(yù)包被在板孔上的黃曲霉毒素B1抗原競爭結(jié)合辣根過氧化物酶標記的黃曲霉毒素B1抗體。與樣本或標準品溶液中的黃曲霉毒素B1結(jié)合的酶標抗體在洗滌時被除去。再加入TMB顯色液,讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素B1抗原的含量成負相關(guān)。對照標準曲線,即可得出相應(yīng)殘留物黃曲霉毒素B1的含量。

試劑配制

1、樣品稀釋液:用去離子水將濃縮樣品稀釋液按1:9體積比進行稀釋(1份濃縮樣品稀釋液+9份去離子水)。

2、洗滌工作液:用去離子水將濃縮洗滌液按1:9體積比進行稀釋。

3、50%甲醇/水:取無水甲醇,用去離子水以1:1倍稀釋(1份無水甲醇+1份水)

操作步驟

1. 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2. 取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8℃。不要冷凍。

3. 洗滌工作液在使用前也需回溫。

4. 將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

5. 加標準品/樣本50ml到對應(yīng)的微孔中,加入酶標物50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境中反應(yīng)15min。

6. 小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌工作液300ml/孔,充分洗滌5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干。

7. 加入顯色液100ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應(yīng)15min。

8. 加入終止液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標儀于450nm處測定每孔OD值。

注意事項

1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導(dǎo)致所有標準的OD值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。

3. 每加一種試劑前需將其搖勻。

4. 反應(yīng)終止液為2M鹽酸,避免接觸皮膚。

5. 不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6. 儲存條件:

保存試劑盒于2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。

7. 試劑變質(zhì)的跡象:

發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。

8. 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為20~30min即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到35min(或更長),但不得超過40min。反之,則減短反應(yīng)時間。

9. 該試劑盒**反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

試劑盒組成

1. 96孔酶標板 …………………………………… 1塊

2. 標準液(1ml/瓶) …………………………… 6瓶

0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb, 8.1ppb

3. 酶標物 1瓶 ……………………………………… 6ml

4. 底物液1瓶 ………………………………… 12ml

5. 終止液1瓶 …………………………………… 6ml

6. 濃縮洗滌液 (10×)…………………………… 40ml

7. 樣品稀釋液(10×) ……………………………… 20ml

8. 操作說明書一份

注意:標準品含有低濃度黃曲霉毒素、終止液含2M HCl,需小心取用。勿在有效期外使用本試劑盒。

貯藏條件及保存期

貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。

保存期:黃曲霉B1試劑盒有效期為12個月。

如果您有技術(shù)上的問題也可以打電話咨詢我們,我們有自己獨立的先進的實驗室,屆時將竭誠為您服務(wù)

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ELISA黃曲霉毒素B1試劑盒(嬰幼兒米粉輔食)

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