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在細(xì)胞生物學(xué)功能研究中，有許多常規(guī)的研究手段，如流式，生物質(zhì)譜，雙向電泳，蛋白芯片等技術(shù)。隨著研究的深入，科學(xué)家們特別需求進(jìn)行真正意義上的高靈敏，高精度研究手段，力求通過一次實(shí)驗(yàn)，快速發(fā)現(xiàn)更多的信息：鑒定結(jié)果更為可信，靈敏度更加提高來鑒定更多低豐度蛋白，更多的修飾信息，結(jié)構(gòu)信息等。傳統(tǒng)分析技術(shù)具有很多局限性，如雙向凝膠電泳(2DE)，對疏水性蛋白、堿性蛋白、特別是低豐度蛋白等無能為力，成為蛋白質(zhì)組研究的瓶頸; 而質(zhì)譜分析技術(shù)也是由于靈敏度等問題，需要大量的樣品等原因，十幾年來一直對研究低豐度調(diào)控蛋白缺乏信心。

傳統(tǒng)蛋白分析技術(shù)所用的蛋白量需來自成千上萬個(gè)細(xì)胞。所得結(jié)果分辨率及重復(fù)性不理想。各種蛋白分析法所需樣品量如下：質(zhì)譜儀樣品量 100000 個(gè)細(xì)胞細(xì)胞儀 樣品量：10000 個(gè)細(xì)胞蛋白電泳，樣品量：5000 個(gè)細(xì)胞蛋白芯片 樣品量：1000個(gè)細(xì)胞

ProteinSimple公司的NanoPro 1000超微量蛋白分析系統(tǒng)為蛋白功能和信號通路研究提供了一個(gè)全新的研究方案。傳統(tǒng)的蛋白研究方法需要成千上萬的細(xì)胞，而NanoPro 1000系統(tǒng)每次分析僅需要25個(gè)細(xì)胞。并可對超微量珍貴樣品的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白之特性直接檢測，適用各種樣品包括：原代細(xì)胞FACS 分選細(xì)胞穿刺抽取之腫瘤細(xì)胞顯微切片組織細(xì)胞分離的干細(xì)胞群

NanoPro系統(tǒng)利用**的毛細(xì)管樣品定位及分析技術(shù)，結(jié)合毛細(xì)管分離及化學(xué)發(fā)光檢測原理進(jìn)行納米級的自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)，避免了人為操作誤差，有效提高檢測結(jié)果的精確性和重復(fù)性。過去蛋白檢測儀無法檢測到的信息，如細(xì)胞內(nèi)控制通路的調(diào)控信息，可由此精確測得。

NanoPro技術(shù)被用來分析信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中所涉及的蛋白構(gòu)象上的極細(xì)微變化。

NanoPro1000從新的角度分析蛋白調(diào)控機(jī)制，NanoPro技術(shù)采用等電點(diǎn)電泳的方法將不同構(gòu)象的蛋白分離。該方法大大推進(jìn)了多個(gè)領(lǐng)域的研究，包括： ·藥物開發(fā)-篩選激酶抑制劑藥物的作用靶點(diǎn)·生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)-觀察疾病引起的蛋白構(gòu)象的細(xì)微變化，研究其發(fā)病機(jī)制

·腫瘤蛋白活性-研究組織和細(xì)胞中腫瘤蛋白的調(diào)控機(jī)制翻譯后修飾的研究-檢測蛋白構(gòu)象改變引起的等電點(diǎn)極細(xì)微的變化

NanoPro 1000將蛋白分離與檢測技術(shù)相結(jié)合:NanoPro將毛細(xì)管等電點(diǎn)電泳和化學(xué)發(fā)光免疫測定這兩種常用的蛋白檢測技術(shù)相結(jié)合。等電點(diǎn)電泳可將不同構(gòu)象的蛋白分離。分離后蛋白被儀器固定在毛細(xì)管壁上，接著用化學(xué)發(fā)光免疫的方法檢測蛋白。這為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白的檢測提供了新的視角。

【操作流程】

上樣

每個(gè)毛細(xì)管中加400nl樣本混合物，包括樣本、熒光標(biāo)記PI和兩性電解質(zhì)。

分離

毛細(xì)管兩端加電壓，樣本中的蛋白質(zhì)隨著自身等電點(diǎn)的不同，加以分離。

固定

毛細(xì)管在紫外光照射下，其毛細(xì)管壁上的**化學(xué)物質(zhì)被激活，從而將分離的蛋白異構(gòu)體固定在毛細(xì)管壁上。

免疫標(biāo)記

用洗脫液將非特異結(jié)合的蛋白質(zhì)洗脫，將固定的蛋白質(zhì)進(jìn)行免疫反應(yīng)，加入發(fā)光催化劑誘導(dǎo)其化學(xué)發(fā)光，發(fā)光信號被CCD攝像機(jī)拍攝下來。

結(jié)果分析

通過專業(yè)的軟件，對結(jié)果進(jìn)行定量分析

關(guān)于PS公司

美國ProteinSimple公司 （簡稱 PS公司）是一家致力于定義未來蛋白質(zhì)分析的生命科學(xué)公司，它結(jié)合了Alpha Innotech、Cell Biosciences、Protein Forest、Brightwell Technologies和Convergent Bioscience等行業(yè)**品牌，為生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、制藥和生物公司提供簡單、精確和高效的技術(shù)平臺。

總部位于加州美國硅谷，在美國加州、加拿大多倫多、加拿大渥太華等地設(shè)有生產(chǎn)和研發(fā)部門，同時(shí)在全球多地設(shè)有辦事處。PS公司重視中國市場的發(fā)展，在北京、上海，廣州和武漢設(shè)有辦事處和技術(shù)服務(wù)中心，為用戶提供完善的技術(shù)支持和售后服務(wù)。