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電穿孔專家 —— 專業(yè)鑄就經(jīng)典

美國BTX公司自1983年成立以來，以電穿孔儀、電融合儀為主要產(chǎn)品，是**家生產(chǎn)高質(zhì)量電穿孔儀器的生產(chǎn)廠家，開創(chuàng)了許多在電穿孔、電融合、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)化等方面的**產(chǎn)品和技術(shù)，不僅為全球在此領(lǐng)域的研究者提供了BTX專業(yè)產(chǎn)品，而且擁有多至25種的配件，包括：電穿孔、電融合、活體導(dǎo)入配件等等，成為全球**專業(yè)的轉(zhuǎn)基因、電融合、活體轉(zhuǎn)基因儀及配件的生產(chǎn)廠家。

ECM® 399 是一款指數(shù)衰減波電穿孔系統(tǒng)，其提供的電場強(qiáng)度和脈沖強(qiáng)度是專為細(xì)菌和酵母的簡單轉(zhuǎn)化而設(shè)計的。在低壓模式中，ECM®399也可以運(yùn)用于部分哺乳動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，是科研和教學(xué)中基本轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的理想選擇，操作簡單，易學(xué)易用（開機(jī)、設(shè)定電壓、放電），經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，一體化設(shè)計，便于攜帶。

可操作性 高、低壓模式，電壓精確可調(diào)

監(jiān)控顯示 液晶屏幕高分辨率顯示電壓峰值、儀器狀態(tài)

安全性能 電弧淬滅功能，短路保護(hù)。

兼容性 PEP，安全臺，35mm培養(yǎng)皿電極

一、 儀器的安全性注意事項(xiàng)

1. 在工作場所提供合適的電源座，位置**遠(yuǎn)離有水環(huán)境，忌在爆炸物或在可傳導(dǎo)的污染環(huán)境里工作。

2. 由于儀器是熱啟動裝置，在夏天開機(jī)后需預(yù)熱20min以蒸發(fā)內(nèi)部水蒸氣，且在每次使用完畢后將電源開關(guān)及電源線拔掉以確保安全。

3. 一個人操作儀器以避免不協(xié)同對儀器造成損壞。

4. 操作儀器前，將樣品完全準(zhǔn)備之后再連接線路以及開機(jī)。

5. 操作池蓋合上才可以操作，忌輕易觸摸內(nèi)部金屬片。

二、 試驗(yàn)操作安全性

實(shí)驗(yàn)操作過程中不可避免會出現(xiàn)擊穿現(xiàn)象，會對儀器造成很大損傷，原因有很多。為較好地維護(hù)儀器，每次實(shí)驗(yàn)時可先用空樣品（只有緩沖液）進(jìn)行試打，以檢驗(yàn)儀器安全性和所用緩沖液的純度，如發(fā)現(xiàn)有電穿情況要立刻停止操作分析原因在進(jìn)行試驗(yàn)。

電爆現(xiàn)象：初始設(shè)置參數(shù)與反饋參數(shù)不一致，反饋值都會很大幅度的降低。

發(fā)生電穿的可能原因：

1. 設(shè)置參數(shù)出現(xiàn)錯誤：場強(qiáng)與電壓的關(guān)系，公司提供的參考數(shù)據(jù)是場強(qiáng)需經(jīng)換算。

　 Ｅ＝ｖ／ｃ（ｃ為電極杯的間隙）

2. 操作池內(nèi)部要始終保持干燥。

3. 如果公司提供的步驟上要求要達(dá)到某種冷凍溫度和時間一定要按要求進(jìn)行。

4. 電極杯和緩沖液**不要有雜質(zhì)。（主要來自電解質(zhì)的污染）

5. 電極杯在使用之前要洗滌干凈，使用時間太長則需要及時丟棄。

6. 兩次操作時間間隔**大于１min，以確保儀器良好散熱。

高電壓警告：為了實(shí)際操作和安全的原因，ECM 399在施加脈沖的過程中，請不要接觸任何電纜或電極連接處，當(dāng)需要連接或拆下電纜時，要檢查系統(tǒng)不在操作中或處于備用狀態(tài)。

試驗(yàn)操作中一些細(xì)節(jié)：

電極杯清洗流程：

電擊使用之前：

1．用滅菌超純水將電極杯反復(fù)清洗兩次（盡量接觸到杯內(nèi)間隙，包括杯蓋）

2．向電極杯中加入電擊緩沖液清洗兩次

3. 棄去清洗液（甩盡液體），置于超凈臺中紫外滅菌30min，待時間結(jié)束后則可進(jìn)行試驗(yàn)操作（電極杯蓋好蓋子置于冰上等待試驗(yàn)用細(xì)胞）

電擊結(jié)束：

1．用清水將電極杯進(jìn)行沖洗

2. 用蒸餾水沖洗2-3次

3．向電極杯中加入75%酒精浸泡，置于燒杯或其他器皿中待用（若兩周后仍無試驗(yàn)需要，則需隔兩周對電極杯進(jìn)行以上清洗過程）

? 選擇合適的電轉(zhuǎn)緩沖液，盡量是低離子濃度緩沖液，減少對電擊參數(shù)的影響，以及避免爆杯。

樣品體積的建議區(qū)間50-80μl

若在電擊過程中出現(xiàn)爆杯或火花現(xiàn)象，原因有兩個：

1． 緩沖液中離子成分太高或電極杯清洗不干凈導(dǎo)致短路

2. 樣品體積太少，造成電流太大形成短路

相應(yīng)解決方法：盡量排除雜質(zhì)、增加樣品體積從而滿足試驗(yàn)參數(shù)要求。